Переливание крови и кровезаменителей в хирургии и педиатрии: Учебное пособие. стр.9
Срок годности стандартных агглютинирующих сывороток составляет 4 месяца при I от +4 до +6 °С. Во избежание ошибок при определении групп крови стандартные гемагглютинирующие сыворотки окрашивают в разные цвета. Сыворотка О (I) группы не окрашивается, и этикетка ее не маркируется. Сыворотка А (II) группы окрашивается в синевато-зеленый цвет, и этикетка маркируется синим цветом. Сыворотка В (III) окрашивается в розовый цвет, и этикетка маркируется красным цветом. Сыворотка АВ (IV) группы окрашивается в желтый цвет, этикетка — тоже в желтый цвет. На этикетке флаконов с сывороткой указывают групповую принадлежность, титр сыворотки, номер серии, срок годности. Титр сыворотки — это ее максимальное разведение, в котором сыворотка дает еще четкую агглютинацию. Оптимальный титр должен быть не ниже 32, т. е. при разведении сыворотки в 32 раза она сохраняет четкую агглютинацию.
Для определения группы крови кровь можно забирать из вены, из пальца, уколов в мякоть ногтевой фаланги.
Оснащение: стандартные сыворотки О (I), А (II), В (III) двух разных серий каждой группы; белые тарелки; стеклянные палочки; пипетки; спирт; ватные шарики; 0,9% раствор хлорида натрия; раствор йода; скарификатор.
Перед определением группы крови необходимо убедиться в пригодности сывороток:
1) флакон не должен иметь трещин, дефектов;
2) на флаконе обязательно должна быть этикетка;
3) обязательно внимательно прочитать срок годности, титр сыворотки, серию и групповую принадлежность;
4) в сыворотке не должно быть хлопьев, осадка, пленок. Сыворотками лучше пользоваться в день вскрытия ампул, но допускается хранение открытых ампул 3-4 дня в холодильнике, при условии если горлышко заклеивается пластилином, лейкопластырем, закрывается ваткой.
3.2. методика определения группы крови простой реакцией
Определение группы крови проводится при температуре + 15- +25 °С на маркированной плоскости (тарелке) белого цвета, где записывается фамилия лица, у которого определяется кровь. На тарелку наносят по 2 капли стандартных сывороток групп Оар (I), А(3 (II), Ва (III) двух серий. Расстояние между каплями не менее 4-5 см. Каждая сыворотка наносится своей пипеткой. Справа от капель сывороток помещают каплю крови, которая должна быть в 5-10 раз меньше капель сывороток. Перемешивают кровь с сыворотками. Можно перемешивать кровь с сывороткой одним и тем же углом предметного стекла (или стеклянной палочкой), но в этом случае после каждого перемешивания необходимо промывать стекло в воде и насухо вытирать. За ходом реакции в общей сложности наблюдают не менее 5 мин, периодически покачивая тарелку. В капли, в которых к третьей минуте наблюдения произошла агглютинация, вносят по 1 капле физиологического раствора и наблюдают еще две минуты. Добавление физиологического раствора не разрушает истинной агглютинации и позволяет отдифференцировать ее от псевдоагглютинации, обусловленной самопроизвольным склеиванием эритроцитов в монетные столбики. Результат оценивается по наличию агглютинации.
Оценка результатов: