Проводится не ранее чем через 5 мин.
1. Если со стандартными сыворотками агглютинации не наступило, значит эритроциты исследуемой крови не имеют аг-лютиногенов и она относится к Ооф (I) группе.
2. Если агглютинация наступила с сывороткой Оар (I) и Ва (III) групп и не наступила с сывороткой А(3 (II), то исследуемая кровь — Ар (II) группы.
3. Если агглютинация наступила с сыворотками Оар (I) и Ар (II) и не наступила с сывороткой Ва (III), значит исследуемая кровь — Ва (III) группы.
4. Наличие агглютинации со всеми стандартными сыворотками не позволяет отнести ее к АВ0 (IV) группе, поскольку возможна панагглютинация. В этом случае на тарелку наносят 2 капли стандартной сыворотки АВ0 (IV) группы и добавляют к ним каплю исследуемой крови. Результат оценивают через 5 мин. Если агглютинации не произошло, то исследуемая кровь — АВ0 (IV) группы.
3.3. метод определения группы крови двойной (перекрестной) реакцией
Для определения группы крови этим методом кроме стандартных сывороток берут стандартные эритроциты групп Оар (I), Ар (II), Ва (III), которые готовят в учреждениях службы крови. Кровь для исследования берут из вены в количестве 5 мл в чистую сухую пробирку без добавления цитрата, для того чтобы можно было получить отдельно сыворотку и эритроциты. Тарелку делят горизонтальной линией на две части. В верхней части ведут исследования стандартными сыворотками с исследуемыми эритроцитами, в нижней — стандартными эритроцитами с исследуемой сывороткой. Через 5 мин проводят оценку и делают заключение о группе крови.
3.4. определение группы крови моноклональными антителами
Моноклональные антитела получают с помощью генной инженерии. АВО-титрующие моноклональные антитела (цолик-лоны анти-А и анти-В) выпускаются в разных странах: Германии, Англии, Канаде, США, России — в промышленных масштабах. Они не являются продуктами клеток человека, их готовят из крови стерильных мышей, поэтому исключено содержание в них вируса гепатита и СПИДа. Принимая во внимание высокую активность и авидность реагентов цоликлон, а также полную их стандартность, для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов анти-А и анти-В. Цоликлон анти-А окрашен в голубой цвет, анти-В — в розовый.
Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями "анти-А" и "анти-В". Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле в соотношении 10 : 1 (0,01 мл). После смешивания реагентов и крови за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2,5 мин.
Оценка результатов:
1. Агглютинации нет ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликло-ном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В, и кровь принадлежит к группе Ооф (I).
2. Агглютинация наблюдается только с цоликлоном анти-А. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат только антиген А, и кровь принадлежит к группе Ар (II).
3. Агглютинация наблюдается только с цоликлоном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат только антиген В, и кровь принадлежит к группе Ва (III).